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小鼠神經干細胞細胞說明書

2025年06月10日 09:28:10      來源:上海勁馬實驗設備有限公司 >> 進入該公司展臺      閱讀量:9

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長期以來,中樞神經系統(tǒng)疾病一直是困擾人類健康的一大難題。1992年,Reynodls
1等從成年小鼠腦紋狀體中分離出能在體外不斷分裂增殖,且具有多種分化潛能的細胞群,并正式提出了神經干細胞(Neural stem cells, NSCs)的概念,從而打破了認為神經細胞不能再生的傳統(tǒng)理論。NSCs的發(fā)現為中樞神經系統(tǒng)損傷疾病的治療及其傷后功能重建帶來了曙光。1997MckayNSCs的概念總結為:具有分化為神經元、星形膠質細胞及少突膠質細胞的能力,能自我更新并可以提供大量腦組織細胞2。隨NSCs在醫(yī)學和研究領域的應用逐漸增多,利用穩(wěn)定的 NSCs細胞株,可以為關于 NSCs的深入研究包括細胞的活動、正常與非正常狀態(tài)等,以及體外構建神經組織代謝性疾病和腦組織損傷的藥物篩選模型,提供可靠的細胞資源,同時為研究工作節(jié)約寶貴的時間和培養(yǎng)費用。
本公司培養(yǎng)出品的取自 SPF級的孕齡 14天的 ICR小鼠(*軍事醫(yī)學實驗動物中心,許可證號:SCXK-(軍)2007-004)胚胎大腦的 SVZ區(qū),用 DFR03神經干細胞培養(yǎng)基(貨號: M1024)進行原代培養(yǎng)。傳代擴增至第二代凍存(DIV15),每支含 1×106個細胞。細胞經檢測,鏡下成球形生長(如1所示);單克隆實驗及 Brdu染色證明其具備良好的增殖能力(如圖 2,3所示);免疫熒光化學實驗表明,該細胞能表達 NSCs的標志性蛋白 nestin(如圖 4所示);5%胎牛血清誘導可分化稱為神經元(neuron)、星形膠質細胞(astrocyte)(如圖 5所示)。品名:ICR小鼠神經干細胞貨號:C3016規(guī)格:1×106cells/管產品特性:
1.    SPF級的孕齡 14天的 ICR小鼠胚胎大腦的 SVZ區(qū)
2.    在特定的已知成分的無血清培養(yǎng)基可自我更新,倍增時間小于 48小時。
3.    在體外具有多分化潛能
 
4.穩(wěn)定的正常二倍體細胞。質量控制:本產品經過了細菌、真菌、霉菌、支原體檢測。運輸與保存:
本品使用 10%DMSO凍存液冷凍,采用干冰保存運輸,收到細胞后,如果不立即復蘇,請將細胞放入液氮中保存待用。切勿置于室溫下,以免造成 DMSO損傷。細胞復蘇方法:
取出凍存管后,投入 37℃水浴中,震蕩解凍,酒精消毒管壁外側后,將其轉入超凈臺中,將管內細胞轉移至離心管中,加入 5mlDFR03神經干細胞培養(yǎng)基, 1000轉,離心 5分鐘,棄去上清,在加入 5mlDFR03神經干細胞培養(yǎng)基,轉入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。產品承諾:
實驗室研究結果表明,本株 ICR小鼠 SVZ來源的 NSCs體外增殖 10代后,仍能夠保持神經干細胞良好的特性。建議使用本公司配套的培養(yǎng)基和正確的培養(yǎng)方法來解凍、傳代,以此保證細胞具備良好的增殖和分化能力。使用:
本產品只提供給進一步的科研使用,不可應用于臨床。附圖(供參考)
1.體外培養(yǎng) 15天( DIV15),第二代 NSCs在培養(yǎng)基中懸浮成球生長圖 2在 1%膠原水凝膠中 NSCs由單個細胞形成克隆球
3.BrdU熒光染色
4.原代 NSCsnestin染色陽性
5.NSCs誘導分化得到的神經元(β -tubulin III陽性 ,綠色)和星形膠質細胞( GFAP陽性,紅色)
參考文獻
1Reynolds BA, Weiss S. Generation of neurons and astrocytes from isolated cells of the adult mammalian central nervous system. Science,1992, 255(5052):1707-1710.
2McKay R. Stem cells in the central nervous system. Science, 1997,276(5309):66
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