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 根據(jù)上海勁馬生物對市場研究進(jìn)行調(diào)查。很多研究者正進(jìn)一步探索幽門螺桿菌抗體其致病機(jī)理，并從不同角度尋找快速、可靠的檢測方法。除尿素呼吸試驗(yàn)外其余方法均需通過檢查才能完成，鑒于取材難題，進(jìn)一步尋找檢測Hp感染的免疫學(xué)方不進(jìn)非常必要的。今日技術(shù)主題勁馬報(bào)道建立一種檢測人體抗Hp抗體的ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)結(jié)果及與細(xì)菌培養(yǎng)法和尿素酶測定法對比檢測結(jié)果，研究證實(shí)本法特異、敏感、合用于大量標(biāo)本普查和及時(shí)判定治療反應(yīng)。國外有人用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測臨床病人血清中有Hp抗體報(bào)道，海內(nèi)尚未有這方面研究講演。

    斑點(diǎn)反應(yīng)板上的固相胃幽門螺桿菌混合抗原與血清中的幽門螺桿菌抗體形成復(fù)合物，膠體金標(biāo)記抗人IgG抗體再與復(fù)合物結(jié)合，形成肉眼可見的紅色圓斑點(diǎn)。

上海勁馬分析具體測定方法：抗原包被微量滴定板：用包被液將抗原按2×108億/ml（含蛋白8.6μg）稀釋后，每孔加100μ，離心籃離心20min2000r/min后，倒去孔內(nèi)液體，然后加入0.25％戊二醛液50μl/孔，4℃固定30min，倒去戊二醛，用洗滌液洗3次（每次3min），加5％小牛血清液，200ml/孔，經(jīng)37℃30min封板后倒去孔內(nèi)液體。每孔加待檢血清(1：100稀釋)100ml，37℃保溫1h后，如上洗滌3次，同時(shí)做陰性對照孔和空白孔。之后于各孔內(nèi)加和新鮮稀釋的酶標(biāo)羊抗人IgG結(jié)合物100ml，37℃保溫半小時(shí)，于各孔中加入2NH2SO450μl終止反應(yīng)后，于酶聯(lián)測定儀以波長490nm測定OD值，將測得標(biāo)本OD值（P）與陰性對照OD值（N）比（P/N），若P/N比大于或等于2.0為陽性。

    結(jié)果：結(jié)果顯示陽性血清稀釋度與OD值呈較好的線性關(guān)系，當(dāng)血清稀釋度為1：50時(shí)OD值為1.521，1：100時(shí)OD值是1.172，P/N比值均大于2.0，故以后實(shí)驗(yàn)中*抗體的血清濃度均用1：100的稀釋度。為了驗(yàn)證ELISA試劑盒間接法用于檢測Hp抗體的特異性，進(jìn)行特異性吸收試驗(yàn)。選用8份Hp感染性血清以1：50稀釋，加等量Hp菌懸液，混勻置37℃半小時(shí)，再置4℃過夜吸收后離心取上清液按上述實(shí)驗(yàn)前提和方法進(jìn)行ELISA測定。為了確定用ELISA測定病人抗Hp抗體的陽性血清濃度，用Hp抗原8.6μg包板，SAHIgG—HRP仍用二個(gè)單位（1：256000），將二份陽性血清混后后稀釋成1：50，1：100，1：200，1：400和1：800五種濃度進(jìn)行ELISA試驗(yàn)，測定OD值的結(jié)果。

    自ELISA試劑盒法建立以來，證實(shí)具有敏感性高，不亂性強(qiáng)等長處，國外報(bào)道已有人用此法來檢測人血清中抗Hp抗體，也證明特異、敏感。但因?yàn)檫@些方法操縱繁鎖，或敏感性低，或可靠性欠佳，故現(xiàn)已較少采用。但ELISA－HpAb法與HpC和HpUT法檢出的陽性病例數(shù)與檢查的診斷和病理診斷是否*相符，有待進(jìn)一步的研究和分析。但常規(guī)培養(yǎng)法需時(shí)3d～7d，HpUT法較快速，但受活檢粘膜內(nèi)菌量多少及取材部位影響較大，短暫停留在胃內(nèi)的腸道菌易造成假陽性結(jié)果。關(guān)于診斷Hp病的血清學(xué)方法，至目前為止主要有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，被動(dòng)血凝集試驗(yàn)，細(xì)菌凝集試驗(yàn)等法。