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一氧化氮（NO）試劑盒說明書

硝酸還原酶法

一、實(shí)驗(yàn)儀器：

試管、微量移液器、旋渦混勻器、離心機(jī)、37°C 恒溫水浴鍋，可見分光光度計(jì)（550nm） 二、適用范圍：

本試劑盒可測血清、血漿、培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)液及動(dòng)植物組織樣本中 NO 含量 三、測定意義：

一氧化氮(  NO  )是近年來生命科學(xué)研究領(lǐng)域中zui熱點(diǎn)課題之一，與心血管、神經(jīng)、胃腸、泌尿、

免疫系統(tǒng)、腎病、肝病、糖尿病、腫瘤、創(chuàng)傷、感染、器管移植排斥反應(yīng)和性功能調(diào)控等都有密切關(guān) 系。NO是一種新的免疫分子和炎癥介質(zhì)、介導(dǎo)內(nèi)毒素、TNF、IL-1β、IL-6 等細(xì)胞因子的病理作用。

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NO化學(xué)性質(zhì)活潑，體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽(NO2  )和硝酸鹽(NO3  )，血清NO2  與NO3  濃度之和 (NO2  + NO3  )，

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才能準(zhǔn)確代表體內(nèi)NO水平。血清  (NO2  +NO3  ) 含量測定，國內(nèi)有的單位采用金屬鎘還原法，但該法操

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作繁瑣 (血清需除蛋白)，反應(yīng)不易控制  (金屬鎘可將NO2  進(jìn)一步還原)，且不能完全將NO3  還原為NO2  ，

準(zhǔn)確性差。 四、操作表：

混勻，37℃準(zhǔn)確水浴 60 分鐘

充分旋渦混勻 30 秒，室溫靜置 10 分鐘，3500～4000  轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清顯色。

混勻，室溫靜置 10 分鐘，蒸餾水調(diào)零，550nm，0.5cm 光徑,測各管吸光度值。

五、計(jì)算公式：

1、血清(漿)中 NO 含量計(jì)算公式：

NO含量

測定OD值 − 空白OD值        標(biāo)準(zhǔn)品濃度      樣品測試前

=                                           ×                          ×

(μ mol / L)

標(biāo)準(zhǔn)OD值 − 空白OD值

(100μ mol / L)

稀釋倍數(shù)

2、組織樣本中 NO 含量計(jì)算公式

NO含量

測定OD值 − 空白OD值

=                                           ×

標(biāo)準(zhǔn)品濃度

待測樣本蛋白濃度

÷

(μ mol / gprot*)

標(biāo)準(zhǔn)OD值 − 空白OD值

(20μ mol / L * *)            ( gprot / L)