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一抗和二抗?jié)舛群头跤龝r(shí)間比對
一抗和二抗在實(shí)驗(yàn)中濃度及孵育時(shí)間有所改變,請按產(chǎn)品說明書上提示時(shí)間操作,本章小編為您具體解析一抗和二抗?jié)舛群头跤龝r(shí)間比對,歡迎參考學(xué)習(xí)!
一抗孵育條件在免疫組化反應(yīng)中zui重要,包括孵育時(shí)間、溫度和抗體濃度。一抗孵育溫度有幾種:4℃、室溫、37℃,其中4℃效果佳;孵育時(shí)間:這與溫度、抗體濃度有關(guān),一般37℃1-2h,而4℃過夜和從冰箱拿出后37℃復(fù)溫45min。具體條件還要摸索。
二抗孵育條件:二抗一般室溫或37℃30min-1h,具體時(shí)間需要摸索,而濃度一般有工作液,若是濃縮液還要摸索濃度。但在免疫組化中我們一般先把二抗?jié)舛群头跤龝r(shí)間先定下,然后去摸索一抗?jié)舛群头跤龝r(shí)間。建議一抗反應(yīng)在4℃佳,反應(yīng)溫和,但時(shí)間超過16~24h。
抗體無論是保存還是運(yùn)輸都應(yīng)盡可能地避免反復(fù)凍融,收到抗體后請根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要,對抗體進(jìn)行分裝,避免同一管抗體反復(fù)凍融(反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體空間結(jié)構(gòu)變 性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力)。抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果,如果抗體保存得當(dāng),抗體活性大部分都可以維持?jǐn)?shù)年。 請謹(jǐn)記,無論何時(shí)請按照說明書推薦的保存條件正確處理和保存抗體。